卵母细胞的体外成熟：女性不孕的新希望？

　　特尔弗小组的最新工作最近发表在《分子人类生殖》杂志上：他们从10名通过剖腹产的妇女身上收集了87个卵泡，并在实验室中成功地将它们发育成成熟的卵子。这意味着人类卵子的成熟不再仅仅取决于女性自身，卵子也可以在体外逐渐成熟，这样就可以为女性不孕症提供一种新的治疗方案，为失去生育能力的女性带来新的希望。

　　卵泡发育是一个极其复杂的过程，主要包括卵巢周期前的卵泡形成和发育以及卵巢周期中期的卵泡发育和成熟。

　　原始生殖细胞向性腺的迁移在怀孕第三周开始，并在怀孕第六周完成。这时在性腺中的生殖细胞被称为卵原细胞，对触发卵巢发育至关重要。在怀孕的第8周，卵原细胞开始进入减数分裂的第1期，成为初级卵母细胞。每个原始卵细胞与来自生殖上皮或卵巢网状结构的单层纺锤形颗粒细胞和单层基底膜一起构成原始卵泡。

　　从青春期开始，原始卵泡继续发育，主要是在下丘脑-垂体-卵巢轴的影响下，形成原始卵泡-窦前卵泡-窦卵泡-排卵前卵泡，最后是成熟卵泡。

　　原始卵泡早在月经周期开始前就已经发育，从原始卵泡到窦前卵泡的形成需要9个多月。从窦前卵泡发育到成熟卵泡，卵泡经历了连续生长阶段（1-4级卵泡）和指数增长阶段（5-8级卵泡），总共持续85天，实际上包括3个月经周期。

　　在胎儿期，卵泡不断萎缩，出生时有100万至200万个；在儿童期，大多数卵泡退化，到青春期时只剩下30万至40万个。一个女人一生中只有400-500个卵泡发育和排卵，仅占总数的0.1%左右，这表明成熟卵泡的重要性。

　　卵泡发育是一个以形态变化为特征的生长过程，伴随着卵泡的功能分化。根据卵泡的形态、大小、生长速度和组织学特征，生长过程可分为以下几个阶段。

　　排卵通常发生在下次月经前14天左右，卵子可以连续从两个卵巢排出，也可以连续从一个卵巢排出。排卵后，卵子被输卵管伞部、输卵管壁的蠕动和输卵管粘膜的纤毛活动拾起，进入输卵管腹部，在那里与峡部汇合，等待受精。当卵子受精时，第二次减数分裂完成，第二极体被排出，形成受精卵。卵子在排卵后12至24小时就会失去受精能力。

　　新鲜的卵巢皮质组织，大小约为5毫米×4毫米（厚度不一），在剖腹产过程中从10名妇女身上取出，并在准备好的解剖介质中运输，随后进行以下四个步骤。

　　切除受损、出血或多余的组织，将组织碎片压平并切割成1x1x0.5 mm3的碎片。切除直径大于40微米的卵泡，以确保碎片中的卵泡是原始的、过渡的或初级的卵泡。在特定条件下经过8天的培养，达到了所需的卵泡数量。

　　剖开步骤1中获得的生长中的卵泡，选择那些具有完整基底膜的卵泡。通过加入人重组激活剂A和rhFSH进一步培养8天，去除受损或退化的卵泡。

　　在特定的压力下，从完整的健康卵泡中提取卵母细胞复合体（COC），然后在含有激活素A和rhFSH的膜上培养4天后，获得含有直径>

　　100微米的卵母细胞的复合体。

　　在含有FSH和LH的培养基中，复合物与直径为100μm的卵母细胞孵化24小时后，极体和卵母细胞被扩大了。该研究显示同时存在中间阶段的II期纺锤体和极性体，证实这些在体外生长的卵母细胞已经获得了减数分裂的能力。

　　相比之下，实验室培养使卵泡成熟时间大大缩短（本研究缺乏关于卵子遗传分析的数据），在实验室中卵子形成只需要22天。人们不禁要问，"成熟 "的卵子是否能正常运作，当它们被人工授精时是否会出现未知的问题。

　　京都大学干细胞生物学家Mitinori Saitou（其团队开发了用胚胎干细胞生产小鼠卵子的方法）指出，短时间的人工成熟不能有效地模仿自然成熟过程，因为自然成熟在体内需要几个月。关于将成品蛋的染色体减半的能力，他认为

　　卵细胞分裂时产生的极性细胞通常很小，而这项工作中获得的极性细胞却异常大。这意味着卵细胞可能没有完全成熟。即使他们的报告是真实的，我认为它也有很多不足之处。

　　特尔弗解释说。

　　卵子成熟得更快，因为体内的发育环境不包含许多抑制性信号。无论是发育速度还是极体大小的差异，都不能说明卵子出了问题。她和她的研究团队正在努力改进这一过程，并希望得到英国人类受精和胚胎学组织的许可，尝试使实验室培育的人类卵子受精，以创造人类胚胎。

　　实验室培育的鸡蛋是有争议的。从实用的角度来看，卵子一直是女性生育能力的一个主要问题，特尔弗科学家的研究意义重大，可以为失去生育能力的妇女带来希望。另一方面，卵子受精后发育的胚胎的健康是另一个值得考虑的问题。

　　正如爱丁堡大学的特尔弗解释的那样，她和她的研究团队仍在努力改进，在实验室培育鸡蛋的道路成为现实之前还有很长的路要走，我们祈祷这项技术继续成熟。